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69 - D Serrani - Agosto 2011

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Trastorno por estrés postraumático y disfunción endotelial y hemostática como predictores tempranos de enfermedad cardiovascular y ateromatosis

Dr. Daniel

Dr. Daniel Serrani en sujetos con IAM previo antes de los 45 años. Niveles altos de t-PA predicen isquemia y mortalidad coronaria. El t-PA tiene menor variabilidad intra-individual que PAI-1. El factor VII forma un complejo con factor tisular de la placa de ateroma y se asocia prospectivamente con episodios agudos de enfermedad coronaria. Objetivos Detectar una asociación significativa entre el TEPT y sus variantes sintomáticas por un lado, y las alteraciones en a) la función endotelial mediada por PCRus, e-Selectina, s-ICAM- 1, v-CAM-1, b) las funciones de coagulación y fibrinolítica de los sistemas hemostáticos sanguíneos (tPI, PAI-1, fvW), c) la función vasodilatadora mediada por DMLA y el volumen mediado por flujo de la arteria braquial como índice de función endotelial, y d) la formación y reorganización de la placa de ateroma a través de MMP-9. De ser significativas, estas asociaciones apuntan a un compromiso temprano de la función endotelial, precursores precoces de la aterogénesis, en el contexto del TEPT. Métodos Controles clínicos Teniendo en cuenta las recomendaciones de la American Heart Association (51), la presión arterial se tomó con un esfigmomanómetro de mercurio después de cinco minutos de reposo, en dos oportunidades espaciadas por cinco minutos cada toma, con el paciente sentado y en el brazo derecho. El peso se determinó con una balanza en bipedestación, aproximando el valor obtenido al 0,1 kg más cercano. La talla se obtuvo utilizando una cinta métrica con el paciente recto en bipedestación contra la pared. El perímetro de la cintura que fue usado para determinar obesidad central se midió en dos ocasiones en posición de pie con los brazos a los lados, con una cinta métrica estandarizada adherida a un peso que ejerce una fuerza de 750 g aplicada de manera horizontal en un punto medio entre la cresta ilíaca y el reborde costal inferior, el resultado se aproximó al 0,1 cm más cercano. El índice de masa corporal se obtuvo dividiendo el peso por la talla al cuadrado (kg/m2). Vasodilatación mediada por flujo La determinación de VMF es una técnica reproducible y de alta precisión, con un coeficiente de correlación de Lin de 0,88) (variabilidad inter-observador = 0,30%, límites de concordancia = -4,48 a 3,87) (52). La VMF de la arteria braquial se realizó según las recomendaciones del International Brachial Artery Reactivity Task Force (53). Todas las mediciones se realizaron en un cuarto con temperatura controlada (24° C) entre las 7 y 10 de la mañana, con un periodo de ayuno de por lo menos 10 horas por parte de los participantes. Se realizó el estudio con los participantes en posición supina, en reposo, con el brazo izquierdo inmovilizado confortablemente en posición extendida para permitir la visualización de la arteria braquial. El diámetro de la arteria braquial y la velocidad del flujo sanguíneo se obtuvieron utilizando un sistema de ultrasonido en modo B con un transductor lineal de 7.5 MHz y 50mm (HLS-475, equipo Honda HS-2000, Japón) localizado entre 4 a 10 cm por encima de la fosa antecubital. Se obtuvo una medición del diámetro de la arteria braquial, así como de la velocidad de flujo sanguíneo basal mediante doppler pulsátil a un ángulo de 70° en relación con la arteria. Posteriormente, un esfigmomanómetro localizado en la parte proximal del brazo se insufló hasta una presión de 300 mmHg durante un periodo de cinco minutos para inducir hiperemia reactiva. Durante el procedimiento se marcó el sitio de posición del transductor, el cual fue cuidadosamente mantenido en la misma posición. La insuflación causa una hiperemia reactiva, la cual a su vez, produce un estrés de dragado o cizallamiento (shear stress) que induce al endotelio para liberar ON, el cual es responsable de la vasodilatación. El VMF refleja la vasodilatación dependiente del endotelio. Luego, el esfigmomanómetro se desinfló y se grabó la señal durante los 15 segundos siguientes para calcular la hiperemia reactiva. La medición del diámetro de la arteria braquial poshiperemia se realizó un minuto después de desinflado el esfigmomanómetro. Los diámetros obtenidos fueron medidos desde la interfase lumen-íntima anterior a la posterior durante tres ciclos cardíacos. Las mediciones fueron efectuadas al final de la diástole, coincidiendo con la onda R en el registro electrocardiográfico simultáneo. La VMF fue calculada como el porcentaje de cambio en el diámetro de la arteria poshiperemia comparado con el estado basal, mediante la siguiente fórmula: (diámetro poshiperemia-diámetro basal / diámetro basal x 100). El flujo de la arteria se calculó para cada estudio multiplicando la integral tiempo – velocidad (corregida para el ángulo) por la frecuencia cardíaca y el área del vaso. La velocidad de flujo fue obtenida del centro del vaso. La hiperemia reactiva se calculó de la siguiente manera: [(flujo sanguíneo 15 segundos después de desinflado el esfigmomanómetro-flujo sanguíneo en reposo) / flujo sanguíneo en reposo] x 100. Las imágenes obtenidas fueron grabadas para su lectura posterior y evaluadas por dos evaluadores independientes y ciegos al FIGURA 6 Flujo de la arteria braquial previa y posterior a la oclusión Los cambios en el pico sistólico (PS) y diastólico (D) de velocidad son consecuencia de la disminución de la resistencia vascular distal e hiperemia reactiva resultante. 20 // EDITORIAL SCIENS

Psicofarmacología 11:69, Agosto 2011 estado de los sujetos. Se encontró un coeficiente de correlación de 0,85 para estas lecturas y se utilizó el promedio de las dos observaciones para los análisis posteriores (figura 6). Determinaciones bioquímicas Al ingreso al estudio, se extrajo a cada sujeto una muestra de 10 cc de sangre venosa antecubital en ayunas, entre las 8 y las 9 de la mañana y con un periodo previo de ayuno de 12 h. Las muestras fueron colocadas en tubos conteniendo citrato de sodio al 3,8% y luego centrifugadas a 2.000 x g durante 20 min a 4° C. Posteriormente, se separaron en plasma, suero y buffy coat, y almacenadas a -80° C. Luego, una alícuota fue procesada para determinación de glicemia y perfil lipídico mediante método enzimático colorimétrico (BTS- 330® BioSystems; Barcelona, España). Otra alícuota de sangre se usó para determinación de hematocrito, hemoglobina, plaquetas y conteo leucocitario (Baker System 9120 AX, Biochem Immunosystem, USA). También se analizaron las muestras almacenadas para determinar las concentraciones de PCRus e interleuquina-6 (IL6) (Immulite 1000®, DCP, Los Ángeles, CA). Las concentraciones plasmáticas de DMLA y L-arginina fueron determinadas por cromatografía líquida de alta precisión (HPLC, Varian Star). La sensibilidad del ensayo fue de 0,41 ng/ml, con un rango de valores de 9,88–61,55 ng/ml y las variabilidades intra-analítica e inter-analítica fueron del 3,1 y del 9,4 %. La MMP-9 y el TIM-1 se cuantificaron empleando una técnica de ELISA en fase sólida (R & D Systems, Inc., Minneapolis, EE.UU). Estándares y muestras se colocaron dentro de microplacas cubiertas con anticuerpos monoclonales específicos. Se cuantificó en una placa la MMP-9 total (MMP-9 activa más pro-MMP-9) y en otra el TIM-1 siguiendo las especificaciones de la casa comercial. Se emplearon varios controles intra e inter ensayo resultado las diferencia entre lecturas inferior al 20 %. Las concentraciones de s-ICAM-1 (molécula de adhesión intercelular soluble-1) se determinaron mediante enzimoinmunoanálisis (ELISA, Parameter Human s-ICAM-1 Immunoassay; R&D Systems, Minneapolis, Estados Unidos). La sensibilidad del ensayo fue de 0,35 ng/ml, con un rango de valores de 2,73–49,55 ng/ml y las variabilidades intraanalítica e inter-analítica fueron del 4,8 y del 10,1 %. El s- v-CAM-1 (molécula de adhesión vascular soluble 1) se midió por ELISA usando un anticuerpo monoclonal específico para s-VCAM-1 (Quantikine Human s-VCAM-1 Immunoassay; R&D Systems, Minneapolis, MN EE.UU.). El límite inferior de detección fue de 0,17–1,26 ng/ml con un rango de 0–200 ng/ ml. Los coeficientes de variación intra-ensayo oscilaron entre 2,3–3,6 % y los coeficientes de variación inter-ensayo fueron de 5,5–7,8 %. La e-Selectina soluble se midió usando un panel enzimático cuantitativo de alta sensibilidad (Parameter Human sE-Selectin Immunoassay; R&D Systems, Minneapolis, MN, EE.UU). El nivel mínimo detectable de e- Selectina fue

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